抽象的
从患者产生的诱导多能干细胞（IPSC）是疾病建模，药物筛选和研究细胞/组织特异性基因的功能的有价值的工具。然而，对于本研究，中源性IPSC线对于从IPSC产生的野生型和突变体分化细胞中的表型比较是重要的。基因编辑技术的出现纠正或产生突变有助于产生具有相同遗传背景的中源性IPSC线。由于易于编程，CRISPR（群集定期间隙的短语重复）-CAS9基因编辑工具在基因操作研究中获得了速度，包括调查癌症的复杂疾病。具有来自腺相关病毒集成点1的药物诱导Cas9表达的IPSC线（AAVS1.) safe harbor位点提供了Cas9的可控表达，并进行了稳健的基因编辑。在这里，我们描述了一个逐步生成和表征这种iPSC系(AAVS1-PDi-Cas9 iPSC)的方法，该方法使用强力霉素(dox)诱导的Cas9表达盒AAVS1.表达gRNAs的慢病毒载体的安全港位点和高效编辑靶基因。这种具有可调Cas9表达的方法可以研究诱导多能干细胞或分化细胞中的基因功能，可作为疾病建模研究的通用工具。
关键词
人体ipsc. AAVS1. 安全港口基因座 诱导Cas9. 基因编辑笔记
致谢
本研究工作由印度政府生物技术部门资助（赠款号码BT / PR17316 / Med / Wellcome Trust India Alliance奖学金[Grant Number IA / S / 17/1 / 503118]到了srv。
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