抽象的
诱导多能干细胞（IPSC）技术的进展提供了组织再生的可再生细胞来源，因此对细胞替代疗法具有很大的承诺。然而，由于人白细胞抗原（HLA）不匹配导致的同种异体移植的免疫排斥仍然是一个重大挑战。已经致力于克服同种异体移植移植的免疫原性的大量努力。其中一种方法是使用基因组编辑技术消除同种异体细胞表面上的HLA分子，以产生通用干细胞。在这里，我们提出了一种简单有效的基因组编辑方法来淘汰β-2-免疫球蛋白（B2M.）基因编码与HLA I类蛋白形成异二聚体的B2M蛋白，在导致HLA A类（HLA-I）耗尽的诱导的多能干细胞（IPSC）中。我们还描述了使用流式细胞术验证B2M敲除IPSC的详细程序，以及用于潜在的偏离目标区域的基因型分析。我们的协议还适用于敲除IPSCS和其他细胞类型中的其他基因。
关键词
CRISPR / CAS9. 诱导多能干细胞（IPSC） 人白细胞抗原（HLA） hla-i-null ipscs 基因敲门 通用干细胞笔记
致谢
本研究得到了泰国研究基金的批准（RSA6280090），Siriraj Research Funce，Mahidol大学医学院Siriraj Research Funce（Rsa6280090），泰国国家研究委员会（NRCT）：NRCT-RGJ63012-126和人力资源和机构发展，研究和创新的计划管理单元（Grant No. B05F630080）。NT由Mahidol University医学院Siriraj医院Siriraj毕业奖学金支持。MW由Chalermphrakiat Grant，Mahidol University医学院Siriraj医院的医学院。
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