摘要
在本章中，我们详细介绍了一种可靠、有效、易于执行的检测支持细胞血-睾丸屏障(BTB)完整性的方法。虽然睾丸中的BTB是由紧密连接(TJ)屏障和基础ES(外质特化，睾丸特有的富肌动蛋白粘附连接(AJ)类型)组成，但该方法适用于所有其他体外血组织屏障，包括血脑屏障的内皮TJ屏障。此外，该方法不需要昂贵的设备，可以在任何标准的生物化学/细胞生物学/分子生物学实验室快速完成。基本思想建立在一个概念之上，即功能性血液组织屏障，如睾丸中的支持细胞所赋予的BTB，能够阻止小的膜不透生物素(如EZ-Link Sulfo-NHS-LC-biotin, Mr. 556.59)通过屏障的扩散。然而，当这一屏障被破坏时，例如用毒物治疗或敲除授予tj屏障功能所需的相关基因后，生物素将穿过屏障，到达支持细胞的细胞质。生物素可以通过链霉亲和素与荧光标记(如Alexa Fluor 488(绿色荧光))结合来显示，该标记可以很容易地在标准荧光显微镜下显示。
关键字
血液屏障 睾丸 BTB完整性试验 塞尔托利氏细胞 精子发生 睾丸笔记
致谢
本研究由温州医科大学资助。
参考文献
-
1.郑翠英，马鲁德(2012)血-睾丸屏障及其在男性避孕中的意义。杂志64:16牧师- 64谷歌学者
-
2.Easton AS(2012)血脑屏障通透性的调节。医学生物学实验763:1-19谷歌学者
-
3.Mruk DD, Cheng CY (2004) Sertoli-Sertoli和sertoli -生殖细胞相互作用及其在精子发生过程中生殖细胞运动中的意义。Endocr 25:747牧师- 806谷歌学者
-
4.Stanton PG(2016)血-睾丸屏障的调节。Semin Cell Dev Biol 59:16 - 173。https://doi.org/10.1016/j.semcdb.2016.06.018 CrossRef谷歌学者
-
5.坎贝尔M,汉弗莱斯(2012页)blood-retina障碍:紧密连接和障碍灯。医学生物学实验763:70-84谷歌学者
-
6.(2003)支持细胞外质特化:基于遗传缺陷和睾丸毒理学的新前景。Anat Sci Int 78:1-16谷歌学者
-
7.De Franca L, Hess R, Cooke P, Russell L(1995)在丙基硫尿嘧啶治疗的大鼠中，新生儿甲状腺功能减退导致支持细胞成熟延迟:支持细胞控制睾丸生长的证据。阿娜特Rec 242:57 - 69谷歌学者
-
8.Mok KW, Mruk DD, Lee WM, Cheng CY(2011)一项关于大鼠睾丸发育过程中血睾丸屏障组装的研究。精子形成1:270 - 280谷歌学者
-
9.Chen H, Lui WY, Mruk DD, Xiao X, Ge R, Lian Q等(2018)监测血睾丸屏障(BTB)完整性:一种体内试验。方法:Mol Biol 1748:245-252。https://doi.org/10.1007/978-1-4939-7698-0_17 CrossRef谷歌学者
-
10.郑春荣(2011)在体外系统研究支持细胞血-睾丸屏障动力学。方法:Mol生物学763:237-252谷歌学者
-
11.grigma J, Wong CC, Zhu LJ, Zong SD, Cheng CY(1998)支持细胞分泌的睾丸与细胞表面相关，其表达与支持-生殖细胞连接的破坏有关，而与支持间紧密连接的破坏无关。J生物化学273:21040-21053谷歌学者
-
12.KIF15通过对Sertoli细胞微管、actin、vimentin和septin细胞骨架的影响来支持精子发生。内分泌科162 (4):bqab010。https://doi.org/10.1210/endocr/bqab010 CrossRef谷歌学者
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