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用于高通量药物筛选和小分子表征的人类多能干细胞

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摘要

人类多能干细胞(hPSCs)，如诱导多能干细胞(iPSCs)，在药物发现、毒理学研究和再生医学方面有着巨大的前景。在这里，我们描述了标准化的协议和实验程序，将自动化细胞培养与小型384孔板中的定量高通量筛选(qHTS)相结合，以实现hPSCs的可扩展生产。作为原理的证明，我们建立了剂量反应评估，并确定了干细胞领域常用的12种小分子化合物的最佳浓度。对包括细胞活力、线粒体膜电位、质膜完整性和ATP生成在内的各种测定结果进行多参数分析，以区分正常生物反应与小分子处理诱导的细胞应激。总的来说，细胞制造、qHTS、高含量成像和数据分析的集成工作流的建立为工业规模项目提供了一个端到端平台，并且应该利用使用hpsc衍生细胞类型的药物发现过程。

关键字

细胞生存能力 剂量反应曲线 胚胎干细胞 高通量筛选 诱导多能干细胞 机器人细胞培养 小分子 毒性
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笔记

致谢

我们感谢国家先进转化科学中心(NCATS)所有同事的合作。这项工作由NIH共同基金的NIH再生医学计划资助，部分由NIH国家先进转化科学中心(NCATS)的校内研究计划资助。图1是使用Biorender.com的图标创建的。

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版权信息

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作者及隶属关系

  1. 1.干细胞翻译实验室(SCTL)，临床前创新部门(DPI)，国家先进转化科学中心(NCATS)美国国立卫生研究院(NIH)罗克维尔市美国

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